Proteaza Staphylococcus aureus v8, którą można stosować samodzielnie lub w połączeniu z innymi proteazami

Proteaza Staphylococcus aureus v8, którą można stosować samodzielnie lub w połączeniu z innymi proteazami

Stopień sekwencjonowania Proteaza V8

Numer katalogu:V813

CAS:66676-43-5

WE:3.4.21.19

faull Name:Rekombinowana proteaza V8 o jakości do sekwencjonowania; szczep V8 Staphylococcus aureus

Synonyms:Proteaza V8; Endoproteinaza Glu-C; Endoproteinaza Asp-C

Temperatura przechowywania: 2-8 ° C

Źródło: Rekombinowana proteaza V8 jest genetycznie modyfikowanym białkiem wyrażanym w E coli

1. OPIS

Rekombinowana proteaza V8 jest rodziną proteaz serynowych i może specyficznie hydrolizować wiązania peptydowe po stronie karboksylowej kwasu glutaminowego lub reszt kwasu asparaginowego.Wiązanie peptydowe na końcu karboksylowym Glu można zidentyfikować i przeciąć w CH₄COONH₄ bufor (pH 7,8) i NH₄HCO₃ (pH 4,0). Zidentyfikuj i rozszczep wiązanie peptydowe na końcu karboksylowym Glu lub Asp w buforze fosforanowym (pH 7,8), a szybkość hydrolizy Glu była wyższa niż w przypadku Glu Asp.Rekombinowana proteaza V8 ma aktywność w zakresie pH 4,0-10,0, a optymalne pH wynosi 8,0-8,5.Może być stosowany samodzielnie lub w połączeniu z innymi proteazami, gdy jest stosowany w trawieniu białek, profilowaniu peptydów i analizie odcisków palców masy peptydów.Inhibitorami proteazy V8 są diizopropylofluorofosforan (DFP), α2-makroglobulina i keton chlorometylowy Na-P-tosylo-L-lizyny (TLCK).

2. GŁÓWNE CECHY

DEFINICJA JEDNOSTKI: Jedną jednostkę definiuje się jako ilość enzymu wymaganą do katalitycznego substratu Z-Phe-Leu-Glu-4-nitranilidu wytwarzającego 1 μmol 4-nitroaniliny na minutę w 25 ° C i pH 7,8.

3. STABILNOŚĆ MAGAZYNOWANIA I TRANSPORTU

Trwałość przechowywania: Rekombinowaną proteazę V8 należy przechowywać w temperaturze 2-8 ° C w szczelnie zamkniętym pojemniku.Po rozpuszczeniu w 1 mM HCl i 50 mM HAC w temperaturze -20 ° C lub niższej jest stabilna przez 6 miesięcyJest stabilny w ciągu 2 miesięcy po rozpuszczeniu w 1 mM HCl i 50 mM HAC w 4 ° C. 85% aktywności powyżej można przechowywać po rozpuszczeniu w 1 mM HCl i 50 mM HAC w 25 ° C lub 37 ° C 12 godzin.Brak utraty aktywności po 10-krotnym wielokrotnym zamrażaniu i rozmrażaniu.

Stabilność transportu: Produkt jest stabilny bltransport izolacji lodowej.

4. RmiPOCHWALIĆ STOSOWANIE

Zauważ, że przed użyciem

1) Podzielić materiał w zależności od użytej ilości, aby uniknąć zanieczyszczenia lub samozacięcia.

2) Rozpuścić białko docelowe.

Docelowe białko rozpuszcza się w buforze do cięcia, na przykład 25-50 mM NH₄HCO₃ pH 7,8, jeśli rozpuszczalność białka docelowego nie jest dobra, białko docelowe zostanie zdenaturowane przez dodanie mocznika, SDS, DTT lub ogrzewanie.Wpływ mocznika i SDS na proteazę V8 przedstawiono w tabeli 1.

3) podsumowanie

Zalecany stosunek proteazy V8 do białka docelowego to 1: 20-1: 100 (W / W). W temperaturze 25 ° C lub 37 ° C strawić białko 2-18h.

Tabela 1: Stabilność proteazy V8 przy różnych stężeniach denaturanta, mocznika 25 ° C 2h, SDS 25 ° C12h

4) Przykład zastosowania: rekombinowana proteaza V8 trawi insulinę

100 μl roztworu insuliny + 198 μl 0,4 M Tris-HCl pH 8,0 + 60 μl 0,1% roztwór białka V8 + woda ultraczysta do 400 μl.Reakcja w łaźni wodnej 37 ° C 2 h plus 6 μl roztworu kwasu fosforowego do zakończenia reakcji, analiza na kolumnie C18:

5. ZALETY PRODUKTU

(1) Rekombinowane białko o jakości sekwencji: wysoka specyficzność, dobra stabilność.

(2) Bez pochodzenia zwierzęcego: Rekombinowana proteaza V8 nie stanowi egzogennego zanieczyszczenia wirusem, a żaden materiał pochodzenia zwierzęcego nie jest używany w procesie produkcyjnym.

(3) Stabilna jakość: produkcja masowa może zapewnić stabilną i ciągłą produkcję seryjną.Nie ma różnicy między jakością partii a jakością produktu jest stabilna.

(4) Wysoka czystość: Wyższa aktywność właściwa. Pozostałości białek macierzystych są mniejsze niż limity produktów biologicznych.

(5) Liofilizowany proszek: Produkt jest liofilizowanym proszkiem i jest łatwy do przechowywania i transportu.

(6) Zgodność z wymogami regulacyjnymi: Urządzenia produkcyjne i środowisko produkcyjne są zgodne z odpowiednimi wymogami regulacyjnymi, a proces produkcji jest w pełni zgodny z systemem jakości NSF ISO 9001: 2015 i wytycznymi GMP.

(7) Kompletne dokumenty dotyczące jakości: możemy zapewnić odpowiednie regularne pliki wsparcia zgodnie z wymaganiami klientów.

6. POWIĄZANE PRODUKTY

Rekombinowana enterokinaza

Trypsyna o stopniu sekwencjonowania

Chymotrypsyna o stopniu sekwencjonowania

Karboksypeptydaza klasy sekwencjonowania B.